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岛津应用:LCMS法测定不同哺乳动物细胞培养基组分差异

[导读] 岛津公司开发出“细胞培养上清液方法包”,该技术平台采用超高效液相色谱三重四极杆液质联用仪,测定不同哺乳动物细胞培养基组分差异。

哺乳动物细胞培养时一般需加入一定量血清,以提供必要的营养成分和细胞调节因子。但是实际生产时很难保证不同批次间血清的一致性,而且血清对哺乳动物细胞存在潜在的毒性作用和外源污染等。为了避免不同批次间血清的质量变动,提高细胞培养和实验结果的重复性,避免血清对细胞的毒性作用和血清源性污染等,很多细胞培养基开发商开始研究开发无血清细胞培养基,即在细胞培养基中加入某些组分来替代血清。因此我们首先需要分析检测添加了血清的培养基和未添加血清的培养基之间的差异性,尽可能多地分析培养基中各组分的相对含量以及不同组分间的配比。

为满足快速全面分析细胞培养上清液组分,将基础碳源、氮源、核苷酸酸、维生素和其他主要代谢物一起检测分析,得到更多有关生物过程中的详细信息,岛津开发出“细胞培养上清液方法包”。该技术平台采用超高效液相色谱三重四极杆液质联用仪,仅需17分钟,即可同时监测分析95种细胞培养上清液营养成份和代谢物的相对丰度变化。本文使用岛津超高效液相色谱仪LC-30A和三重四极杆质谱LCMS-8050联用,利用“细胞培养上清液方法包”建立了哺乳动物细胞培养基中营养物质和细胞代谢物的液相色谱-串联质谱的同时分析方法,供相关人员参考。

 
 
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